a) 通过活体动物的 OPU 技术从屠宰场卵巢或活体动物收集的卵母细胞体外成熟 (IVM)。
b) 体外受精 (IVF)， 成熟的卵母细胞通过性交精液或精英公牛精液的精子受精。
c) 体外培养 (IVC) 程序，受精的卵母细胞在适当的培养基中培养以发育至囊胚阶段。 一般牛的培养时间为7天。 根据物种，培养时间各不相同。 胚胎移植的适当时机可使受体动物的妊娠率最大化。
卵母细胞收集：以前，在体外胚胎生产计划中，胚胎是从屠宰场采购的卵巢中发育而来的。目前由于技术的进步，卵母细胞是通过牛活体采卵OPU方法从供体母牛的巢中采集的。 这可以在很短的时间内从动物身上重复回收卵母细胞，并从种牛身上产生更多的胚胎。
卵母细胞分级：卵母细胞分级可以根据卵丘-卵母细胞复合体 (COC) 层数、卵丘细胞扩张、细胞质外观（颜色、一致性和透明带完整性）进行。
体外成熟 (IVM)：IVM 过程需要一定的体外环境来发育胚胎，这些要求概括为 38.5oC 温度，空气中 5% CO²，90-95% 湿度 22-24 小时，在 35 滴 75μL 成熟培养基。 需要专门的细胞培养设备
精子选择：精液吸管在 38.5oC 下解冻 1 分钟，然后将精液收集在 DPBS 培养基中，然后在室温下以 750-x g 离心 5 分钟。 离心后，将精液样品重悬于含有牛血清白蛋白（BSA）6 mg/mL、丙酮酸钠22 mg/mL、青霉素100 IU/mL、链霉素0.1 mg/mL、补充有酪氨酸乳酸溶液的IVF培养基中。 肝素 20 毫克/毫升。 然后在空气中 5% CO2 的湿润气氛中于 38.5oC 下孵育 15 分钟以促进获能。 精液样本在 IVF 培养基中的最终浓度为 1x106 精子/mL。
小牛公母胚胎的精子选择：公母分选对精子质量有负面影响。它改变了精子活力的模式；减少细胞存活期。研究人员采用了一种新技术，通过使用针对公牛精子表位开发的单克隆抗体来生产预选胚胎。这种抗体以简单易行的过程分离 X 和 Y 精子，并提供预选的胚胎生产。该方法的作用机制包括固定雄性精子，XX精子将与卵母细胞的卵膜结合，然后受精。他们发现对照组和X-精子分选组之间推定受精卵产生的百分比没有显着差异（P>0.05），但早期卵裂胚胎有81.2±1.4、78.3±1.0和66.7的差异。 ±1.1% 分别用于对照组、X 精子分选组和 Y 精子分选组。
体外受精：成熟的 COC 保存在 4 孔培养皿中进行受精。 每口井含有 500 mL 的 IVF 培养基和精子。 这些 4 孔培养皿在 5% CO²和 38.5oC 的空气中培养 18-20 小时。
体外培养：此过程在 38.5℃ 温度、5% CO2 空气和 90-95% 湿度下进行。 培养物保存在 4 孔培养皿中，其中含有 500 mL CR1-aa 培养基。
