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对牛OPU活体采卵前供体牛的准备

作者:admin | 发布时间:2023-09-05 17:14 | 标签:OPU活体采卵供体牛牛采卵
对母牛活体采卵-体外胚胎生产(OPU-IVP)与多排卵处理的体内胚胎采集不同,短期内可以多次实施,胚胎生产效率也逐年提高。采集卵子的供卵牛要求遗传能力高,以及健康强健性高。现在很多机关和农场都采用了基因组评价,遗传能力在出生的小牛被繁殖供用之前就判明了。OPU是在阴道插入探头,用放入直肠的手将卵巢引导到探头上,一边看超声波图像一边从安装在探头上的向导将吸引针穿刺到卵泡中,将卵子连同卵泡液一起吸引采集的技术。因此,探头和手分别进入阴道和直肠,如果可以操作的话可以实施。

牛opu活体采卵

1、年龄(月)

(1)年轻牛(未经产牛6~10个月龄)

 
IVP可以使用从2个月龄的小牛的卵巢中采集的卵子制作胚盘胞,通过移植这些胚盘胞可以生产小牛。也就是说,即使是小牛也可以OPU,如果可以采集卵子的话,可以制作移植胚胎,犊牛虽然卵巢较小,但卵泡数量与成年母牛相差无几,可以采集卵,且产生的囊胚具有生育能力,可产犊。

另外,对9~10个月大的性成熟前的母牛犊进行了7次OPU-IVP,每隔7天进行7次,每次收集了22.4个卵子和5.0个囊胚。收集的卵数和产生的胚胎数与对照组的母牛(2至3岁)产生的19.0和5.9相同,但囊胚发生率与对照组相比有显着性(p< 0.05)低于成年奶牛。我们还发现,通过将发育好的囊胚移植为新鲜胚胎可以获得高受孕率(78.9%),并且我们还能够在玻璃化囊胚中确认受孕。这样,虽然可以使用OPU-IVP从母牛性成熟前的小牛身上产生胚胎,但也可以使用OPU-IVP从尚未性成熟的小牛身上产生胚胎;为了登记牛目前,存在捐赠者基本登记未完成等问题,需要提前与相关机构核实。

(2)老齢牛

另一方面,只要老龄牛的卵巢中还有卵泡,就可以通过OPU来采集卵子,但效率会逐渐变差。 奶牛的卵泡数量不太可能像人类那样迅速减少,但预计老年奶牛的卵泡数量会减少,质量也会恶化。B牛在11天内接受OPU 4次,数据是收集鸡蛋。对于其他接受过多次 OPU 的奶牛,以足够的时间间隔重复进行 OPU。 由于收集内部胚胎变得困难,对两只奶牛进行了 OPU-IVP。总共11个OPU-IVP中,产生了9次囊胚,虽然胚胎生产效率低于普通牛,但可以稳定生产胚胎。

2、出生史
 

(1)小母牛——未经产母牛
 
小母牛的 OPU-IVP 可能分为三个阶段。第一个是针对性成熟前小母牛的 OPU-IVP,第二个是针对性成熟后但怀孕前的小母牛,最后一个是针对怀孕的小母牛。比较这三个阶段的小母牛,确实卵巢本身随着生长而变大,但卵泡的数量似乎没有太大变化。也有报道称,卵巢中存在的卵泡数量因个体而异,并且卵泡数量在卵泡波与卵泡波之间具有高度再现性,并且在性成熟前后没有太大变化。因此,认为性成熟前、性成熟后和怀孕小母牛卵巢中存在的卵泡数量不受内分泌变化的显着影响。然而,随着个体卵子和卵泡的直径随着身体的生长而逐渐增大,IVP的胚胎生成率被认为提高,性成熟后IVP的胚胎生成率比性成熟前更高,囊肿的发生率增加。

(2)经产牛
 
经产牛的产次也比初产牛重复,身体和卵巢重量变大,一般认为牛的成熟年龄是48个月龄。据报告,荷斯坦物种的采卵成绩逐渐提高,到36~48个月龄,多排卵处理的卵巢反应将迎来高峰。这表示在这个时期对用于多排卵处理的FSH反应的卵泡很多,但OPU比多排卵处理更广泛,报告称没有月龄的差异。
 
经产牛实施OPU的时期有生理空胎期间、生理空胎期间后到妊娠(非妊娠期)、妊娠后(妊娠期)3种。生理性空胎期间为分娩后约40天,在此期间相当于子宫恢复、分娩后初次排卵及初次发情等生殖器官的大转换期。我们在分娩后10~20天的生理空胎期间尝试OPU-IVP,并与分娩后40天后实施的OPU-IVP进行比较。结果,生理性空胎期间的OPU-IVP中培养卵子数为16.1个,胚盘胞数为5.6个,40日以后各为24.5个及8.7个,确认了培养卵子数有显著差异。
 
妊娠期OPU不会成为早期胚胎死亡及流产的原因。另外,有关于胚胎生产效率在妊娠期和非妊娠期没有差异的报告,我们也用妊娠期的荷斯坦种4头进行了检查,确认了妊娠期和非妊娠期OPU-IVP的胚胎生产效率没有差异。另外,在OPU前后采血观察了血液中的前列腺素浓度的变化,但没有发现OPU前后的下降,也没有发生流产,分娩了4头健康的小牛。

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