对母牛做活体采卵他们只需选择供体并对其进行超排操作,无需繁殖或热检测。 在促卵泡激素刺激后,兽医执行经兽用B超机超声引导的 OPU,收集小瓶中的卵母细胞。 然后通过过滤器过滤和搜索小瓶的内容物,类似于传统的胚胎冲洗。 一旦回收,卵母细胞将被冲洗并放入装有培养基的小瓶中,并通过多功能卵母细胞运输箱运送到 IVF 实验室。 卵母细胞在运输过程中成熟,到达实验室后成熟(总共 22 至 24 小时),然后受精。
在让配子共同孵育过夜后,去除死的卵丘和精子细胞,并将假定的受精卵转移到不同类型的培养基中成熟,称为培养基。 培养基旨在模拟子宫的化学组成,胚胎发育正是在这种培养基中发生的。 抽吸一周后,产生的胚胎既可以运回客户进行新鲜胚胎移植,也可以冷冻以备日后移植。 作为 OPU/IVF 服务的一部分,胚胎移植是兽医创收的另一种简单方式。
限制 OPU/IVF 计划采用的因素之一是高技能的兽医必须执行愿望。 掌握 OPU 需要高技术技能,以及对培训、设备和设施的投资。 因此,执行 OPU 程序的从业者数量有限; 然而,随着对这项服务的需求增长,越来越多的兽医正在接受培训,并将 OPU/IVF 服务纳入他们的业务计划,并为他们的实践创造新的收入。
给母牛做活体采卵前需要做哪些准备?
进行 OPU 所需的基本设备包括配备阴道内探头以观察卵巢的超声机和导针器(也称为探头支架),导针器通过导针器/导管装置穿刺卵泡并收集其内容物 . 此外,需要一个抽吸泵(负压泵)来产生吸力,这会导致卵泡液和卵母细胞流过管道并进入收集瓶。 需要许多加热设备,包括试管加热器、过滤器加热器、加热台和阶段加热器,以使卵母细胞保持在 35°C 和 37°C 之间的一致温度。卵母细胞的冷休克会导致减数分裂纺锤体解离,导致在胚胎发育之前停止,因此在整个过程中保持卵母细胞温暖是至关重要的。
除了设备之外,感兴趣的兽医还需要接受培训以掌握抽吸技术。培训可以通过不同的途径完成,但在完成初始课程后,必须进行数周的练习。虽然在卵巢超声和胚胎移植 (ET) 方面有经验的兽医是提供 OPU 服务的绝佳人选,但两种技术之间肯定存在技术方面的差异,许多长期 ET 从业者将学习 OPU 过程描述为令人羞愧。在提供商业服务之前,标准建议在训练后的前三个月对练习动物进行至少 100 次抽吸。如果恢复率(即恢复的卵母细胞数除以吸出的卵泡数)仍然低于标准,则需要额外的练习。恢复率随着经验的增加而增加,应该超过 75%,以使该程序对客户经济有效。从初始培训到提供商业服务的时间长短取决于许多因素:初始培训之前的设备和设施准备、触诊和超声技能、练习动物的可用性、练习课程的频率、技术支持和主动性都在发挥作用。这个过程通常需要四到八个月。
所需的最终投资是在足够的设施中收集卵母细胞。收集中心通常被称为卫星中心,因为它们通常位于离集中式 IVF 实验室相当远的地方。设施设计最重要的方面之一是有效控制温度的能力。为获得最佳胚胎发育,抽吸和卵母细胞搜索区域均应保持在 27°C 和 32°C 之间,并且具有较小但可操作的区域允许更经济有效的加热/冷却。像所有的处理设施一样,为 OPU 设计的设施应该便于牛的移动,而供体的暂存区有利于时间管理。最后,建议使用能够充分限制供体的挤压溜槽,尤其是对于某些品种的牛。
为了满足那些关注生物安全或不想拖运牛的客户,一些兽医通过创建移动实验室来做出回应。 这些移动实验室允许从业者在任何有加热收集室的地方进行抽吸,然后在移动实验室中处理卵母细胞。 这种便利性使更多生产者可以使用 OPU/IVF 服务,但确实需要兽医进行更多的旅行和调度协调。