在冷冻或转移牛胚胎之前，必须将胚胎吸入 0.25cc 的细管中。无论是加载带有 EG 的细管用于冷冻，还是加载保持介质用于转移新鲜胚胎或解冻的甘油胚胎，加载顺序基本相同。加载吸管的图像如下：
A、如果您要转移牛新鲜胚胎或解冻的甘油胚胎，请在一个培养皿的侧面和盖子上标上“HOLDING”（保持）字样，然后将注射器过滤器保持介质放入培养皿中。该培养皿将用于分离您正在加载的胚胎，并用于漂洗吸管并将保存介质的部分吸入吸管中。
下面的顺序描述了为新鲜移植加载胚胎，或为移植重新加载解冻的甘油胚胎。 但是，如果您要装载胚胎进行冷冻，步骤是相同的。 不同之处在于将使用 EG （乙二醇）而不是保存介质。请注意，基本上所有介质和空气段都是目测加载的（不是通过显微镜观察），因此段长度是正确的。只有当您将胚胎引导到吸管中时，才会使用显微镜。
B、将包含所有要转移的胚胎的培养皿放到显微镜载物台上。 将其中一个胚胎从组中吸入 IVF 导管。 从舞台上取下这道菜，并用新贴上标签的盛放介质的盘子取而代之。 将胚胎释放到盘子中，然后将其操纵到盘子的中心。 对胚胎的阶段和质量进行分级，并将此信息记录在 B 部分 - 转移证书下。
一旦您看到胚胎进入吸管，将您的眼睛从目镜上移开并目视监测柱长，同时继续将固定介质拉入吸管，直到该部分长 45 毫米或多或少。 在您继续延长该部分时，将吸管保持在大约 45° 角，以帮助胚胎保持在该部分的中心。 把吸管尖从盘子里拿出来。 该部分包含胚胎。
下面的顺序描述了为新鲜移植加载胚胎，或为移植重新加载解冻的甘油胚胎。 但是，如果您要装载胚胎进行冷冻，步骤是相同的。 不同之处在于将使用 EG （乙二醇）而不是保存介质。请注意，基本上所有介质和空气段都是目测加载的（不是通过显微镜观察），因此段长度是正确的。只有当您将胚胎引导到吸管中时，才会使用显微镜。
B、将包含所有要转移的胚胎的培养皿放到显微镜载物台上。 将其中一个胚胎从组中吸入 IVF 导管。 从舞台上取下这道菜，并用新贴上标签的盛放介质的盘子取而代之。 将胚胎释放到盘子中，然后将其操纵到盘子的中心。 对胚胎的阶段和质量进行分级，并将此信息记录在 B 部分 - 转移证书下。
一旦您看到胚胎进入吸管，将您的眼睛从目镜上移开并目视监测柱长，同时继续将固定介质拉入吸管，直到该部分长 45 毫米或多或少。 在您继续延长该部分时，将吸管保持在大约 45° 角，以帮助胚胎保持在该部分的中心。 把吸管尖从盘子里拿出来。 该部分包含胚胎。
B、将包含所有要转移的胚胎的培养皿放到显微镜载物台上。 将其中一个胚胎从组中吸入 IVF 导管。 从舞台上取下这道菜，并用新贴上标签的盛放介质的盘子取而代之。 将胚胎释放到盘子中，然后将其操纵到盘子的中心。 对胚胎的阶段和质量进行分级，并将此信息记录在 B 部分 - 转移证书下。
C、将新的、干燥的 0.25cc 吸管的棉塞端直接插入 1cc 三部分鲁尔滑动注射器的尖端。 当您推动并转动吸管使其抵靠尖端开口时，您可能需要将吸管保持在一个微小的角度。 棉塞的大部分长度将插入注射器尖端，形成紧密的气密密封，让您可以通过吸管抽真空。
D、首先将注射器柱塞向后拉 0.2cc 来冲洗吸管，然后将吸管的开口端降低到盛有单个胚胎的培养皿中。 将吸管尖放在盘子边缘附近，远离位于盘子中心的胚胎。 吸出 20mm 的培养基柱，将吸管从培养基中拔出，然后将培养基拉至距离棉塞 10mm 以内。 不要弄湿插头的任何部分！ 慢慢按下柱塞以丢弃介质。
E、细管现在已准备好加载培养基、空气和胚胎的部分（随后的柱长测量值是近似值）。 吸出 10 毫米的培养基，然后将吸管尖从培养皿中取出。 该段最终会弄湿棉塞。
F、用拇指和食指轻轻向上/向后推柱塞，直到吸管末端出现 6 毫米的空隙。
G、将吸管放入培养皿中并吸出 40mm 的培养基，然后将吸管尖从培养皿中抬起。 该部分称为“推动”液体。
H、用拇指和食指轻轻向上/向后推柱塞，直到吸管末端出现 6mm 的空隙。
I、将吸管放入培养皿中并吸出 3mm 的培养基。 这创建了将容纳胚胎的片段的开始。 在低倍率下观察胚胎时，将吸管的边缘放在胚胎附近。 轻轻撞击（推）胚胎，将吸管尖端略微向上提起，类似于舀取的动作。 此动作将使胚胎从培养皿底部升起并“漂浮”在吸管的正前方，从而使您可以将胚胎吸入吸管中。
一旦您看到胚胎进入吸管，将您的眼睛从目镜上移开并目视监测柱长，同时继续将固定介质拉入吸管，直到该部分长 45 毫米或多或少。 在您继续延长该部分时，将吸管保持在大约 45° 角，以帮助胚胎保持在该部分的中心。 把吸管尖从盘子里拿出来。 该部分包含胚胎。
J、用拇指和食指轻轻向上/向后推柱塞，直到吸管末端出现 6 毫米的空隙。
K、将吸管放入培养皿中并吸出 5mm 的培养基，然后将吸管尖从培养皿中抬起。 这被称为媒体的入口段。 剩余的 4-5mm 吸管应不含介质，并接受密封塞。 暂时不要弄湿插头。
L、在润湿塞子之前，必须确认胚胎被捕获在适当的介质段中。 从舞台上取下装有介质的盘子。 将装载的吸管水平放置在显微镜台上，并用食指将其固定在那里。 胚胎会沉到吸管的底部边缘。 但是，不可能专注于稻草的底部。 因此，将焦点（低倍率）放在吸管的顶部边缘，位于包含胚胎的部分的一端。 当您通过显微镜观察时，慢慢地将吸管拉过载物台并同时滚动吸管。 如果胚胎在该部分中，您将能够看到它，因为胚胎会暂时漂浮在吸管的顶部边缘。 如果您没有在该段的中间部分看到胚胎，请务必仔细检查该段在半月板深色弯曲处的每一端。
M、如果您识别出胚胎并位于正确的培养基段，则应将注射器柱塞向后拉，直到棉塞中心被培养基浸透。 棉塞的中心包含聚氯乙烯 (PVC) 粉末，这种粉末在潮湿时会膨胀并膨胀，在吸管末端起到半永久密封的作用。 从准备转移的吸管上拆下注射器。
如果检查确定胚胎位置错误或不在吸管中，您可以轻轻推动柱塞并将内容物排出回培养皿中并重新加载。 如果因为塞子已经湿了而无法排出内容物，只需剪掉棉塞即可。这释放了真空并允许内容物排入培养皿中。
